研究方向
阿拉伯芥醣類代謝突變株的分子遺傳分析
澱粉是植物光合作用的主要產物之一,雖然對 儲存性澱粉代謝的途徑已經有很多的研究報導,但 是關於葉片中暫存性澱粉代謝的途徑、調控機制及 其在植物生理上的功能,至今仍有待釐清。為研究 澱粉代謝的調控機制,我們以阿拉伯芥為材料篩選 影響葉中澱粉含量的突變株,利用遺傳、生化、分 子生物等方法分析這些突變株並分離其基因,希望 能藉由基因序列、表現方式、及對澱粉代謝的改 變,以了解這些基因,在澱粉代謝途徑與調控上所 扮演的角色。
一般咸認為α 澱粉水解酶是最先參與分解澱粉 的酵素,其後在其他酵素如β 澱粉水解酶協同作用 下,將澱粉分解成醣類小分子。但是經由分析阿拉 伯芥的突變株,發現在沒有α 澱粉水解酶的植物 裏,澱粉的代謝與野生型沒有差異,顯示葉片中暫 存性澱粉降解的機制與儲存性澱粉降解不相同。我 們在分析阿拉伯芥澱粉代謝突變株: mex1 , dpe1 , dpe2 時,發現在這些突變株中,澱粉、麥 芽糖(或寡多醣)大量的累積,顯示在葉片中澱粉 分解成麥芽糖(或寡多醣)後,若沒有正常的送出 葉綠體或進一步的代謝時,經由未知的回饋調節途 徑,將造成澱粉無法正常分解,這些結果顯示β 澱 粉水解酶在暫存性澱粉降解可能是一較重要的降解 酵素,阿拉伯芥中有九個β 澱粉水解酶基因,經由 突變株的分析,確定其中至少有四個基因參與澱粉 降解,我們的分析結果可以架構出一個新的暫存性 澱粉降解的代謝途徑。
目前我們在分析數株多澱粉突變株,包括ke81 及ke103 。突變株ke81 中缺乏一葉綠體型α 澱粉水 解酶,而ke103 缺乏一葉綠體型β 澱粉水解酶,但 是由這些突變株的分子遺傳分析,顯示這兩個突變 株的澱粉水解酶基因並沒有發生突變,推測這些突 變株應為調控型的突變株,對這些突變株的研究, 可幫助我們了解澱粉代謝的調控。另外我們發現大 部參與澱粉代謝的基因,在不同的組織及光照週期 中,它們的訊息RNA 有類似的表現形式,這種同 步表現主要是經由轉譯因子來調控,需要進一步的 研究來解開此一調控的機制。